Для визначення нікотину та його метаболітів у сечі можуть бути використані різні методи: газова хроматографія/мас-спектрометрія (ГХ/МС), рідинна хроматографія/мас спектрометрія (РХ/МС), радіоімунний аналіз, імуноферментний аналіз та інші.